Questão 11 — Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) (Biologia Molecular) — Diretoria de Ensino da Marinha · Marinha do Brasil 2018

Biologia Molecular Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)

Diretoria de Ensino da Marinha 2018 Superior

Marinha do Brasil · Oficial do Quadro Técnico do Corpo Auxiliar da Marinha — Ciências Biológicas · Caderno Amarela

Gabarito disponível

A técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) é amplamente utilizada em estudos do DNA e RNA. A sequência correta dos passos básicos desta técnica laboratorial, resultando em trechos de DNA isolados e prontos para análises posteriores (análise ou leitura do DNA), é:

Selecione uma alternativa A) primeiro ciclo: desnaturar DNA (altas temperaturas, +/- 70°C), paralisar reações enzimáticas; segundo ciclo: Precipitação em álcool; terceiro ciclo: iniciadores (primers) agindo sobre DNA. Replicação de molde de DNA, ação da DNA polimerase. B) primeiro ciclo: desnaturar DNA (altas temperaturas, +/- 90°C), paralisar reações enzimáticas; segundo ciclo: iniciadores (primers) agindo sobre DNA; terceiro ciclo: replicação de molde de DNA, ação da DNA polimerase. Repetição dos ciclos, amplificação do DNA. C) primeiro ciclo: desnaturar DNA (altas temperaturas, +/- 90°C), paralisar reações enzimáticas; segundo ciclo: Precipitação em álcool; terceiro ciclo: iniciadores (primers) agindo sobre DNA. Replicação de molde de DNA, ação da DNA polimerase. Repetição dos ciclos, amplificação do DNA. D) primeiro ciclo: iniciadores (primers) agindo sobre DNA; segundo ciclo: desnaturar DNA (altas temperaturas, +/- 90°C), paralisar reações enzimáticas; terceiro ciclo: replicação de molde de DNA, ação da DNA polimerase. Repetição dos ciclos, amplificação do DNA. E) primeiro ciclo: ação enzimática + detergentes aniônicos: precipitação em álcool; segundo ciclo: desnaturar DNA (altas temperaturas, +/- 70°C), paralisar reações enzimáticas; terceiro ciclo: replicação de molde de DNA, ação da DNA polimerase. Repetição dos ciclos, amplificação do DNA.

Resolução comentada

PCR: desnaturação, anelamento dos primers, extensão e repetição dos ciclos.

A PCR começa com a desnaturação do DNA a cerca de 90 °C ou mais. Seguem o anelamento dos primers e a extensão pela DNA polimerase. A repetição dos ciclos amplifica o DNA. A B apresenta essa ordem.

Análise das alternativas

A: usa 70 °C, inclui a precipitação em álcool e omite a repetição dos ciclos. C: inclui a precipitação em álcool, que é etapa de extração e não de PCR. D: coloca os primers antes da desnaturação. E: começa pela extração com detergente e usa 70 °C.

Referência: Biologia molecular: etapas da PCR.

Resolução comentada do VaiConcursos.